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DAP-seq技術(shù)揭示花生中AhTWRKY24和AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子下游調(diào)控基因

更新時間:2023-11-06      點擊次數(shù):913

202364日,青島農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院宋輝教授課題組的研究成果,發(fā)表在Oil Crop Science期刊上,文章題目為Identification of the target genes of AhTWRKY24 and AhTWRKY106 transcription factors reveals their regulatory network in Arachis hypogaea cv. Tifrunner using DAP-seq。該研究使用DNA親和純化測序(DAP-seq)技術(shù)鑒定了AhTWRKY24AhTWRKY106的結(jié)合基序以及下游基因。并結(jié)合RNA-seq數(shù)據(jù)揭示AhTWRKY24AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子可以調(diào)控參與干旱脅迫響應(yīng)的下游基因。

研究背景

WRKY轉(zhuǎn)錄因子是植物對生物和非生物脅迫反應(yīng)的重要核心調(diào)控因子。花生是一種重要的油料和蛋白質(zhì)作物?;ㄉ哂袛?shù)百個WRKY轉(zhuǎn)錄因子成員,但是對于它們的功能和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)仍不清楚。本研究前期鑒定了花生中具有耐旱功能的部分同源的AhTWRKY24AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子。以此為基礎(chǔ),本研究利用DAP-seq技術(shù)并結(jié)合轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)推導(dǎo)了AhTWRKY24AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

研究結(jié)果

1、該實驗前期使用生物信息學(xué)方法預(yù)測出了AhTWRKY24AhTWRKY106這兩個轉(zhuǎn)錄因子的亞細(xì)胞定位。對AdWRKY40、AiWRKY23、AhTWRKY24AhTWRKY106的編碼序列(CDS)和蛋白質(zhì)序列進(jìn)行多重序列比對,揭示了它們的保守區(qū)域。并使用RNA-seq數(shù)據(jù)分析AhTWRKY24AhTWRKY106 TFs22個組織中的表達(dá)模式。

1. AhTWRKY24AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子及其同源蛋白的序列比對和表達(dá)模式。


2、利用DAP-seq技術(shù)研究AhTWRKY24AhTWRKY106的結(jié)合基序和下游基因

2. AhTWRKY24AhTWRKY106結(jié)合的Peaks在染色體上的分布

3. AhTWRKY24AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合W-box元件。

4. AhTWRKY24AhTWRKY106調(diào)控基因表達(dá)的模式圖


3、聯(lián)合DAP-seqRNA-seq結(jié)果分析AhTWRKY24 and AhTWRKY106對干旱脅迫的響應(yīng)。


5. AhTWRKY24AhTWRKY106調(diào)控不同干旱脅迫時期的差異表達(dá)基因 (DEGs) 。

6. AhTWRKY24AhTWRKY106調(diào)控不同干旱脅迫時期的同源基因表達(dá)差異。


研究結(jié)果表明,AhTWRKY24AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子不僅序列相似性高,而且都通過結(jié)合W-box元件來調(diào)節(jié)下游基因。它們既可以協(xié)同調(diào)控下游基因,也可以特異性調(diào)控下游基因來參與對干旱脅迫的響應(yīng),但兩者所調(diào)控下游基因的數(shù)量無明顯差異。該結(jié)果為進(jìn)一步研究AhTWRKY24AhTWRKY106轉(zhuǎn)錄因子的功能和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了參考。





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